మన చుట్టూ ఎందరో అజ్ఞాత వీరులు ఉన్నారు, వారు మామూలు వ్యక్తులుగా కనిపించినా, వాస్తవానికి మనకు నిశ్శబ్దంగా ఎంతో మేలు చేస్తారు. మాలిక్యులర్ డయాగ్నోస్టిక్స్ పరిశ్రమలో ప్రోటీనేస్ కె అటువంటి 'అజ్ఞాత వీరుడు'. పరిశ్రమలోని 'పెద్ద మరియు శక్తివంతమైన' వాటితో పోలిస్తే ప్రోటీనేస్ కె చాలా తక్కువ ప్రాచుర్యంలో ఉండటం వల్ల, మనం దాని ప్రాముఖ్యతను చాలాకాలం పాటు విస్మరించాము. కొత్త కరోనా మహమ్మారి ప్రబలడంతో, ప్రోటీనేస్ కె కు డిమాండ్ విపరీతంగా పెరిగింది, మరియు దేశ విదేశాలలో సరఫరా వినియోగానికి చాలా వెనుకబడి ఉంది. దాంతో ప్రోటీనేస్ కె ఎంత ముఖ్యమైనదో అందరూ అకస్మాత్తుగా గ్రహించారు.
ప్రోటీనేస్ K యొక్క ఉపయోగం ఏమిటి?
ప్రోటీనేస్ K అనేది ప్రోటీయోలైటిక్ ఎంజైమ్ చర్యను కలిగి ఉన్న ఒక సెరైన్ ప్రోటీయేస్ మరియు ఇది విస్తృత శ్రేణి వాతావరణాలలో (pH (4-12.5), అధిక-లవణ బఫర్, 70°C అధిక ఉష్ణోగ్రత, మొదలైనవి) తన చర్యను కొనసాగించగలదు. అదనంగా, ప్రోటీనేస్ K యొక్క చర్య SDS, యూరియా, EDTA, గ్వానిడిన్ హైడ్రోక్లోరైడ్, గ్వానిడిన్ ఐసోథయోసయనేట్ మొదలైన వాటి ద్వారా నిరోధించబడదు, మరియు కొంత పరిమాణంలో డిటర్జెంట్ కూడా ప్రోటీనేస్ K యొక్క చర్యను మెరుగుపరుస్తుంది. వైద్య చికిత్స (వైరస్ మరియు సూక్ష్మజీవుల నిర్మూలన), ఆహారం (మాంసం మెత్తబరచడం), తోలు (జుట్టును మృదువుగా చేయడం), వైన్ తయారీ (ఆల్కహాల్ను స్పష్టం చేయడం), అమైనో ఆమ్లాల తయారీ (క్షీణించిన ఈకలు), న్యూక్లియిక్ ఆమ్లాల సంగ్రహణ, ఇన్ సిటు హైబ్రిడైజేషన్ మొదలైన వాటిలో ప్రోటీనేస్ K కు అనువర్తనాలు ఉన్నాయి. అత్యంత సాధారణంగా ఉపయోగించే అనువర్తనం న్యూక్లియిక్ ఆమ్లాల సంగ్రహణ.
ప్రోటీనేస్ K, నమూనాలోని అన్ని రకాల ప్రోటీన్లను, న్యూక్లియిక్ ఆమ్లాలతో గట్టిగా బంధించబడిన హిస్టోన్లతో సహా, ఎంజైమోలైజ్ చేయగలదు. దీనివల్ల న్యూక్లియిక్ ఆమ్లాలు నమూనా నుండి విడుదలయ్యి, ఎక్స్ట్రాక్ట్లోకి విడుదలవుతాయి, ఇది తదుపరి వెలికితీత మరియు శుద్ధీకరణ దశను సులభతరం చేస్తుంది. వైరల్ న్యూక్లియిక్ ఆమ్లాన్ని గుర్తించడంలో, వైరస్ శాంప్లింగ్ ద్రావణంలో ప్రోటీనేస్ K ఒక ముఖ్యమైన భాగం. ప్రోటీనేస్ K వైరస్ యొక్క కోట్ ప్రోటీన్ను విచ్ఛిన్నం చేసి, నిష్క్రియం చేయగలదు, ఇది రవాణా మరియు గుర్తింపు దశలో మరింత సురక్షితం; అదనంగా, ప్రోటీనేస్ K, RNaseను కూడా క్షీణింపజేసి, వైరల్ RNA క్షీణతను నివారిస్తుంది మరియు న్యూక్లియిక్ ఆమ్ల గుర్తింపును సులభతరం చేస్తుంది.
ప్రోటీనేస్ K యొక్క రాత్రికి రాత్రే వచ్చిన కీర్తి
శాస్త్రీయ పరిశోధన రంగంలో అయినా లేదా IVD రంగంలో అయినా, న్యూక్లియిక్ ఆమ్ల సంగ్రహణ అనేది అత్యంత ప్రాథమిక ప్రయోగం, కాబట్టి ప్రోటీనేస్ K ఎల్లప్పుడూ చాలా ముఖ్యమైనదిగా ఉంది. అయితే, గతంలో, ప్రోటీనేస్ K పాత్రతో పోలిస్తే దాని గురించి చాలా తక్కువగా తెలుసు. దీనికి ప్రధాన కారణం ప్రోటీనేస్ K యొక్క సరఫరా మరియు డిమాండ్ సంబంధం చాలా స్థిరంగా ఉండటమే. ప్రోటీనేస్ K సరఫరా ఒక సమస్య అవుతుందని కొద్దిమంది మాత్రమే ఆలోచించేవారు.
కొత్త కరోనా మహమ్మారి వ్యాప్తితో, న్యూక్లియిక్ యాసిడ్ పరీక్షలకు డిమాండ్ విపరీతంగా పెరిగింది. 2020 జూన్ చివరి నాటికి, చైనా దాదాపు 9 కోట్ల కొత్త కరోనా పరీక్షలను పూర్తి చేసింది, మరియు ఈ సంఖ్య ప్రపంచ స్థాయిలో మరింత ఆందోళనకరంగా ఉంది. న్యూక్లియిక్ యాసిడ్ సంగ్రహణ ప్రయోగాలలో, ప్రోటీనేస్ కె యొక్క క్రియాశీల సాంద్రత సుమారు 50-200 μg/mL ఉంటుంది. సాధారణంగా, ఒక న్యూక్లియిక్ యాసిడ్ నమూనా నుండి సంగ్రహించడానికి సుమారు 100 μg ప్రోటీనేస్ కె అవసరం అవుతుంది. వాస్తవ వినియోగంలో, న్యూక్లియిక్ యాసిడ్ సంగ్రహణ సామర్థ్యాన్ని పెంచడానికి, తరచుగా ప్రోటీనేస్ కె ను అధిక పరిమాణంలో ఉపయోగిస్తారు. కొత్త కరోనావైరస్ యొక్క న్యూక్లియిక్ యాసిడ్ గుర్తింపు, ప్రోటీనేస్ కె కు భారీ డిమాండ్ను తీసుకువచ్చింది. ప్రోటీనేస్ కె యొక్క అసలు సరఫరా-డిమాండ్ సమతుల్యత త్వరగా దెబ్బతింది, మరియు ప్రోటీనేస్ కె రాత్రికి రాత్రే ఒక ముఖ్యమైన మహమ్మారి నివారణ పదార్థంగా మారింది.
ప్రోటీనేస్ K ఉత్పత్తిలో ఇబ్బందులు
మహమ్మారి వ్యాప్తితో ప్రోటీనేస్ K యొక్క ప్రాముఖ్యతను ప్రజలు గుర్తించినప్పటికీ, ప్రోటీనేస్ K లభ్యత చాలా తక్కువగా ఉండటం వల్ల, కొన్ని దేశీయ కంపెనీలు మాత్రమే దాని ఉత్పత్తిలో పాలుపంచుకుంటున్నాయి అనేది విచారకరమైన విషయం. ప్రోటీనేస్ K ఉత్పత్తిని స్థాపించాలనుకున్నప్పుడు, ఉత్పత్తి ప్రక్రియలో ప్రోటీనేస్ K ఒక అత్యంత ప్రత్యేకమైన ప్రోటీన్ అని కనుగొనబడింది. తక్కువ సమయంలో ప్రోటీనేస్ K ఉత్పత్తి సామర్థ్యాన్ని విస్తరించడం చాలా సవాలుతో కూడుకున్నది.
ప్రోటీనేస్ K యొక్క భారీస్థాయి ఉత్పత్తి ఈ క్రింది ఇబ్బందులను ఎదుర్కొంటుంది
1. తక్కువ వ్యక్తీకరణ
ప్రోటీనేస్ K చాలా ప్రోటీన్లను నిర్దిష్టత లేకుండా విచ్ఛిన్నం చేయగలదు మరియు ఎక్స్ప్రెషన్ హోస్ట్ కణానికి తీవ్రమైన విషాన్ని కలిగించగలదు. అందువల్ల, ప్రోటీనేస్ K యొక్క ఎక్స్ప్రెషన్ స్థాయి సాధారణంగా చాలా తక్కువగా ఉంటుంది. ప్రోటీనేస్ Kను అధికంగా వ్యక్తీకరించే ఎక్స్ప్రెషన్ సిస్టమ్లు మరియు స్ట్రెయిన్ల స్క్రీనింగ్కు సాధారణంగా ఎక్కువ సమయం పడుతుంది.
2. వర్ణకాలు మరియు న్యూక్లిక్ ఆమ్లాల అవశేషాలు
భారీ స్థాయిలో జరిగే కిణ్వ ప్రక్రియ అధిక మొత్తంలో వర్ణద్రవ్యం మరియు హోస్ట్ న్యూక్లియిక్ ఆమ్ల అవశేషాలను ప్రవేశపెడుతుంది. ఈ మలినాలను ఒక సాధారణ శుద్ధీకరణ ప్రక్రియతో తొలగించడం కష్టం, మరియు సంక్లిష్టమైన శుద్ధీకరణ ఖర్చును పెంచి, పునరుద్ధరణ రేటును తగ్గిస్తుంది.
3. అస్థిరత
ప్రోటీనేస్ K తగినంత స్థిరంగా ఉండదు, అది తనను తాను ఎంజైమోలైజ్ చేసుకోగలదు, మరియు రక్షక ఏజెంట్ లేకుండా దానిని 37°C వద్ద ఎక్కువ కాలం స్థిరంగా నిల్వ చేయడం కష్టం.
4. సులభంగా అవక్షేపం చెందుతుంది
ప్రోటీనేస్ K యొక్క ఫ్రీజ్-డ్రైడ్ పౌడర్ను తయారుచేసేటప్పుడు, ఆ పౌడర్లో ప్రోటీనేస్ K యొక్క ఘన పదార్థం అధికంగా ఉండేలా చూసుకోవడానికి, అధిక గాఢతలో ఫ్రీజ్-డ్రైడ్ ప్రొటెక్టివ్ ఏజెంట్ను కలపడం అవసరం. కానీ, ప్రోటీనేస్ K గాఢత 20mg/mL మరియు అంతకంటే ఎక్కువకు చేరినప్పుడు, అది సులభంగా గడ్డకట్టి అవక్షేపంగా మారుతుంది. ఇది అధిక ఘన పదార్థం ఉన్న ప్రోటీనేస్ K యొక్క ఫ్రీజ్-డ్రైయింగ్కు గొప్ప ఇబ్బందులను కలిగిస్తుంది.
5. భారీ పెట్టుబడి
ప్రోటీనేస్ K బలమైన ప్రోటీయేస్ క్రియాశీలతను కలిగి ఉంటుంది మరియు ప్రయోగశాలలో ఇతర ప్రోటీయేస్లను జలవిశ్లేషణ చేయగలదు. అందువల్ల, ప్రోటీనేస్ K పరిశోధన, అభివృద్ధి మరియు ఉత్పత్తి కోసం ప్రత్యేకమైన ఉత్పత్తి ప్రాంతాలు, పరికరాలు మరియు సిబ్బంది అవసరం.
XD బయోకెమ్ యొక్క ప్రోటీనేస్ K ద్రావణం
XD బయోకెమ్ ఒక పరిణతి చెందిన ప్రోటీన్ ఎక్స్ప్రెషన్ మరియు ప్యూరిఫికేషన్ ప్లాట్ఫామ్ను కలిగి ఉంది, మరియు రికాంబినెంట్ ప్రోటీన్ల ఎక్స్ప్రెషన్, ప్యూరిఫికేషన్ మరియు ఉత్పత్తి ప్రక్రియల ఆప్టిమైజేషన్లో విస్తారమైన అనుభవాన్ని కలిగి ఉంది. పరిశోధన మరియు అభివృద్ధి బృందాన్ని వేగంగా ఏర్పాటు చేయడం ద్వారా, ప్రోటీనేస్ K యొక్క భారీ-స్థాయి ఉత్పత్తి ప్రక్రియను అధిగమించడం జరిగింది. ఫ్రీజ్-డ్రైడ్ పౌడర్ యొక్క నెలవారీ ఉత్పత్తి 30 కేజీలకు పైగా ఉంటుంది. ఈ ఉత్పత్తి స్థిరమైన పనితీరును, అధిక ఎంజైమ్ నిర్దిష్ట క్రియాశీలతను కలిగి ఉంది, మరియు ఇందులో హోస్ట్ సైటోక్రోమ్ మరియు న్యూక్లియిక్ యాసిడ్ అవశేషాలు ఉండవు. ట్రయల్ ప్యాకేజీని పొందడానికి XD బయోకెమ్ను సంప్రదించడానికి స్వాగతం (ఇ-మెయిల్:sales@xdbiochem.comఫోన్: +86 513 81163739).
XD బయోకెమ్ యొక్క సాంకేతిక పరిష్కారాలలో ఇవి ఉన్నాయి
మల్టీ-కాపీ ప్లాస్మిడ్ ఇంటిగ్రేషన్ను ఉపయోగించి, 8g/L వ్యక్తీకరణ స్థాయి కలిగిన అధిక-వ్యక్తీకరణ స్ట్రెయిన్లను ఎంపిక చేస్తారు, ఇది ప్రోటీనేస్ K యొక్క తక్కువ వ్యక్తీకరణ స్థాయి సమస్యను అధిగమిస్తుంది.
బహుళ-దశల శుద్ధీకరణ ప్రక్రియను ఏర్పాటు చేయడం ద్వారా, హోస్ట్ సైటోక్రోమ్ మరియు ప్రోటీనేస్ K యొక్క న్యూక్లియిక్ యాసిడ్ అవశేషాలను ప్రామాణిక విలువ కంటే తక్కువ స్థాయికి విజయవంతంగా తొలగించారు.
రక్షిత బఫర్ ఫార్ములేషన్ల హై-త్రూపుట్ స్క్రీనింగ్ ద్వారా, 37°C వద్ద ప్రోటీనేస్ Kను స్థిరంగా నిల్వ చేయగల బఫర్ను ఎంపిక చేయడం జరిగింది.
స్క్రీనింగ్ బఫర్లు, అధిక గాఢతలలో ప్రోటీనేస్ K సులభంగా సమూహంగా ఏర్పడి అవక్షేపం చెందే సమస్యను అధిగమించి, ప్రోటీనేస్ K యొక్క అధిక ఘనపదార్థం గల ఫ్రీజ్-డ్రైయింగ్కు పునాది వేస్తాయి.
XD బయోకెమ్ ప్రోటీనేస్ K నమూనా
XD బయోకెమ్ ప్రోటీనేస్ K స్థిరత్వ పరీక్ష: గది ఉష్ణోగ్రత వద్ద 80 రోజుల తర్వాత క్రియాశీలతలో గణనీయమైన మార్పు ఉండదు
XD బయోకెమ్ ప్రోటీనేస్ K స్థిరత్వ పరీక్ష: గది ఉష్ణోగ్రత వద్ద 80 రోజుల తర్వాత క్రియాశీలతలో గణనీయమైన మార్పు ఉండదు.
XD బయోకెమ్ ప్రోటీనేస్ K మరియు పోటీ ఉత్పత్తుల యొక్క న్యూక్లియిక్ ఆమ్ల వెలికితీత ప్రభావాన్ని పోల్చడం. న్యూక్లియిక్ ఆమ్ల వెలికితీత ప్రక్రియలో, వరుసగా XD బయోకెమ్ మరియు పోటీ ప్రోటీనేస్ K ఉపయోగించబడతాయి. XD బయోకెమ్ ప్రోటీనేస్ K యొక్క వెలికితీత సామర్థ్యం ఎక్కువగా ఉంటుంది మరియు లక్ష్య జన్యువు యొక్క Ct విలువ తక్కువగా ఉంటుంది.
పోస్ట్ చేసిన సమయం: డిసెంబర్ 31, 2021