4-నైట్రోఫెనైల్ బీటా-డి-గాలక్టోపైరనోసైడ్ CAS:200422-18-0

ప్రభావం: ONPG అనేది β-గాలక్టోసిడేస్ అనే ఎంజైమ్ యొక్క ఉనికిని మరియు క్రియాశీలతను గుర్తించడానికి ప్రత్యేకంగా ఉపయోగించే ఒక సబ్‌స్ట్రేట్. β-గాలక్టోసిడేస్ ఎంజైమ్ ఉండి, క్రియాశీలంగా ఉన్నప్పుడు, అది ONPGని ఓ-నైట్రోఫెనాల్ మరియు ఒక గాలక్టోస్ ఉత్పన్నం అనే రెండు ఉత్పత్తులుగా విడగొడుతుంది. ఓ-నైట్రోఫెనాల్ విడుదల కావడం వల్ల పసుపు రంగు మార్పు వస్తుంది, దీనిని స్పెక్ట్రోఫోటోమీటర్‌ను ఉపయోగించి కొలవవచ్చు.

అనువర్తనం: అణు జీవశాస్త్రం మరియు జీవరసాయన శాస్త్ర పరిశోధనలో ONPGకి అనేక అనువర్తనాలు ఉన్నాయి:

β-గాలక్టోసిడేస్ క్రియాశీలత నిర్ధారణ: β-గాలక్టోసిడేస్ ఎంజైమ్ యొక్క క్రియాశీలతను కొలవడానికి మరియు పరిమాణీకరించడానికి ONPG సాధారణంగా ఉపయోగించబడుతుంది. ఎంజైమ్ క్రియాశీలతకు నేరుగా అనులోమానుపాతంలో ఉండే ఓ-నైట్రోఫెనాల్ ఏర్పడే రేటును స్పెక్ట్రోఫోటోమెట్రిక్‌గా కొలవవచ్చు.

జన్యు వ్యక్తీకరణ మరియు నియంత్రణ: జన్యు వ్యక్తీకరణ మరియు నియంత్రణ అధ్యయనాలకు సంబంధించిన ప్రయోగాలలో ONPGని తరచుగా ఉపయోగిస్తారు. నిర్దిష్ట ప్రమోటర్ల నియంత్రణలో ఉన్న జన్యువుల వ్యక్తీకరణను అధ్యయనం చేయడానికి, సాధారణంగా ఉపయోగించే lacZ ఫ్యూజన్ సిస్టమ్ వంటి ఫ్యూజన్ ప్రోటీన్ అస్సేలలో దీనిని తరచుగా ఉపయోగిస్తారు. ONPGని ఉపయోగించి కొలిచిన బీటా-గాలక్టోసిడేస్ చర్య, జన్యు వ్యక్తీకరణ స్థాయిపై అవగాహనను అందిస్తుంది.

β-గాలక్టోసిడేస్ క్రియాశీలత కోసం స్క్రీనింగ్: β-గాలక్టోసిడేస్‌ను సంకేతపరిచే LacZ జన్యువు యొక్క ఉనికిని మరియు కార్యాచరణను గుర్తించడానికి, రికాంబినెంట్ DNA టెక్నాలజీలో ONPGని ఒక కలరిమెట్రిక్ స్క్రీనింగ్ పద్ధతిగా ఉపయోగించవచ్చు. ఈ స్క్రీనింగ్ పద్ధతి, కావలసిన జన్యువును కలిగి ఉన్న క్లోన్‌లను గుర్తించడంలో సహాయపడుతుంది.

ఎంజైమ్ గతిశాస్త్ర అధ్యయనాలు: β-గాలక్టోసిడేస్ ఎంజైమ్ యొక్క గతిశాస్త్రాన్ని అధ్యయనం చేయడానికి ONPG కూడా ఉపయోగపడుతుంది. వివిధ సబ్‌స్ట్రేట్ గాఢతల వద్ద ఎంజైమ్-సబ్‌స్ట్రేట్ చర్య యొక్క రేటును కొలవడం ద్వారా, మైఖేలిస్-మెంటెన్ స్థిరాంకాలు (Km) మరియు గరిష్ట చర్య రేట్లు (Vmax) వంటి గతిశాస్త్ర పారామితులను నిర్ధారించడం సాధ్యమవుతుంది.