4-నైట్రోఫినైల్ బీటా-D-గెలాక్టోపైరనోసైడ్ CAS:200422-18-0

ప్రభావం: ONPG అనేది ఎంజైమ్ β-గెలాక్టోసిడేస్ ఉనికిని మరియు కార్యాచరణను గుర్తించడానికి ప్రత్యేకంగా ఉపయోగించే ఒక ఉపరితలం.β-గెలాక్టోసిడేస్ ఎంజైమ్ ఉన్నప్పుడు మరియు క్రియాశీలంగా ఉన్నప్పుడు, అది ONPGని రెండు ఉత్పత్తులుగా విడదీస్తుంది: o-నైట్రోఫెనాల్ మరియు గెలాక్టోస్ ఉత్పన్నం.ఓ-నైట్రోఫెనాల్ యొక్క విముక్తి పసుపు రంగు మార్పుకు దారితీస్తుంది, దీనిని స్పెక్ట్రోఫోటోమీటర్ ఉపయోగించి కొలవవచ్చు.

అప్లికేషన్: ONPG మాలిక్యులర్ బయాలజీ మరియు బయోకెమిస్ట్రీ పరిశోధనలో అనేక అప్లికేషన్‌లను కలిగి ఉంది:

β-గెలాక్టోసిడేస్ చర్య యొక్క నిర్ధారణ: ONPG సాధారణంగా β-గెలాక్టోసిడేస్ ఎంజైమ్ యొక్క కార్యాచరణను కొలవడానికి మరియు లెక్కించడానికి ఉపయోగిస్తారు.ఎంజైమ్ కార్యకలాపాలకు నేరుగా అనులోమానుపాతంలో ఉండే ఓ-నైట్రోఫెనాల్ ఏర్పడే రేటును స్పెక్ట్రోఫోటోమెట్రిక్‌గా కొలవవచ్చు.

జన్యు వ్యక్తీకరణ మరియు నియంత్రణ: ONPG తరచుగా జన్యు వ్యక్తీకరణ మరియు నియంత్రణ అధ్యయనాలకు సంబంధించిన ప్రయోగాలలో ఉపయోగించబడుతుంది.నిర్దిష్ట ప్రమోటర్ల నియంత్రణలో జన్యువుల వ్యక్తీకరణను అధ్యయనం చేయడానికి సాధారణంగా ఉపయోగించే lacZ ఫ్యూజన్ సిస్టమ్ వంటి ఫ్యూజన్ ప్రోటీన్ పరీక్షలలో ఇది తరచుగా ఉపయోగించబడుతుంది.ONPGని ఉపయోగించి కొలవబడిన బీటా-గెలాక్టోసిడేస్ కార్యాచరణ జన్యు వ్యక్తీకరణ స్థాయికి సంబంధించిన అంతర్దృష్టులను అందిస్తుంది.

β-గెలాక్టోసిడేస్ యాక్టివిటీ కోసం స్క్రీనింగ్: ONPGని β-గెలాక్టోసిడేస్ ఎన్‌కోడ్ చేసే LacZ జన్యువు ఉనికిని మరియు కార్యాచరణను గుర్తించడానికి రీకాంబినెంట్ DNA సాంకేతికతలో కలర్‌మెట్రిక్ స్క్రీనింగ్ పద్ధతిగా ఉపయోగించవచ్చు.ఆసక్తి ఉన్న జన్యువును కలిగి ఉన్న క్లోన్‌లను గుర్తించడంలో ఈ స్క్రీనింగ్ పద్ధతి సహాయపడుతుంది.

ఎంజైమ్ గతిశాస్త్ర అధ్యయనాలు: ONPG β-గెలాక్టోసిడేస్ ఎంజైమ్ యొక్క గతిశాస్త్రాన్ని అధ్యయనం చేయడంలో కూడా ఉపయోగపడుతుంది.వివిధ సబ్‌స్ట్రేట్ సాంద్రతలలో ఎంజైమ్-సబ్‌స్ట్రేట్ ప్రతిచర్య రేటును కొలవడం ద్వారా, మైఖెలిస్-మెంటన్ స్థిరాంకాలు (కిమీ) మరియు గరిష్ట ప్రతిచర్య రేట్లు (విమాక్స్) వంటి గతి పారామితులను గుర్తించడం సాధ్యపడుతుంది.